Presentiamo una tecnologia per l’isolamento multiscala (analitica-di laboratorio-di produzione) di Vescicole Extracellulari (VE), che supera le limitazioni dei metodi attualmente disponibili. Contrapposta a tradizionali sistemi “affinity-based” che sfruttano anticorpi, la nostra tecnologia rappresenta un radicale cambio di paradigma nello sviluppo di sonde di affinità per vescicole, ovvero l’utilizzo di peptidi sensibili alla curvatura delle membrane biologiche (membrane sensing peptides – MSP-) per la cattura specifica e allo stesso tempo universale (non dipendente da marcatori superficiali) di tutte le VE di piccole dimensioni (50-200nm). I MSPs possono essere prodotti sinteticamente, in modo scalabile e a costi ridotti, e offrono una grande versatilità di integrazione su supporti analitici o di purifica di diversa natura.
I tradizionali metodi di affinità per l’isolamento delle VE si basano generalmente sull’utilizzo di anticorpi per proteine presenti sulla loro membrana. Tuttavia tali marcatori non sono uniformemente espressi nelle varie sottopopolazioni di VE. Come tali, consentono un recupero parziale e non pienamente rappresentativo delle VE presenti in un campione. La tecnologia basata su MSPs da noi proposta trascende questa problematica, essendo l’affinità diretta verso caratteristiche universali delle piccole vescicole (carica e curvatura di membrana). Questo determina una cattura ad alta resa ed universalmente rappresentativa, oltre che permettere di isolare VE di specie vegetali e animali indifferentemente. Gli aspetti sintetici e di scale-up prospettico verso l’isolamento di VE su larga scala sono inoltre totalmente peculiari di questi ligandi, dal momento che gli anticorpi non trovano alcuna applicazione in questo settore per via degli elevati costi.
PCT